效液相色谱仪流动相溶剂的要求 液相色谱如何使用

高效液相色谱仪流动相为溶剂，既有运载作用，又和固定相一样，参与对组分的竞争，因此溶剂的选择对分离十分重要。 一、溶剂对于待测样品必须具有合适的极性和良好的选择性。 二、溶剂要与检测器匹配： 1、对于紫外吸收检测器，应选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长长。 溶剂的紫外截止波长指当小于截止波长的辐射通过溶剂时，溶剂对此辐射产生强烈吸收，此时溶剂被看作是光学不透明的，会严重干扰组分的吸收检测。 2、对于示差折光检测器，要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相，以达**高灵敏度。 三、高纯度： 由于高效液相色谱灵敏度高，对流动相溶剂的纯度要求也高，不纯的溶剂会引起基线不稳或产生伪峰，痕量杂质将使截止波长值增加 50～100nm。 四、化学稳定性好： 不能选用与样品发生反应和聚合的溶剂。 五、低粘度： 常用的低粘度溶剂有丙酮、乙醇和乙腈等。 若溶剂粘度高，会增高压力，不利于分离。但溶剂粘度过低（如戊烷等），易在色谱柱和检测器内形成气泡，影响分离。 几项液相色谱仪常见故障排除方法

　　液相色谱仪结构复杂，且不同型号的色谱仪，出故障时产生的现象有可能不同，以下几项液相色谱仪常见故障排除方法仅供参考：

　　1、检测器开机时屏幕显示不正常，出现缺字、坐标图形异样、光标无法移动等象

　　原因：工作电源不正常或仪器附件有强干扰源存在；

　　排除方法：检查工作电源电压，采取稳压措施；关机后重新开机；检测器微机系统故障；

　　2、柱前压力逐渐升高

　　原因：

　　（1）流动相中存在大颗粒的物质；

　　（2）样品未经过过滤处理；

　　（3）柱子输入端滤片，污染；

　　对应排除方法：

　　（1）流动相经＜5μ的真空抽滤瓶过滤后再使用；

　　（2）样品须经滤膜过滤；

　　（3）拆下柱的滤片用超声波清洗,同时刮去柱口表面被污染的固定相；

　　3、输液泵压力指示为零(或＜0.5MPa)且柱后无液体流出

　　原因：

　　（1）柱前导管接头漏液；

　　（2）泵柱室内有大量气泡存在；

　　（3）贮液瓶内试剂用完；

　　（4）输液泵未工作；

　　对应排除方法：

　　（1）检查各接口是否有漏液；

　　（2）放开泵出口接头；用“清洗”键冲洗泵体；

　　（3）添加流动相；

　　（4）按输液泵操作方法，检查其工作状态；

　　4、组分峰极小或不出峰

　　原因：

　　（1）波长选择不正确；

　　（2）检测器输出衰减太大；

　　（3）进样口漏液；

　　（4）进样阀样品废液管堵塞，样品未进入定量管；

　　（5）进样后未按启动键；

　　（6）定量管容积过小；

　　（7）样品浓度过稀；

　　（8）检测器灯源老化或失效；

　　（9）流动相不纯；

　　对应排除方法：

　　（1）按标准重新选择波长；

　　（2）重新选择输出量程范围；

　　（3）修理进样阀；

　　（4）拆下六通阀上废液管(5#,6#)重新安装；

　　（5）进样后立即按启动键；

　　（6）更换大容量定量管；

　　（7）浓缩样品后再进样；

　　（8）更换灯源；

　　（9）选择高纯度的流动相；

　　5、输液泵压力指示超过规定的范围，且柱后无液体流出

　　原因：

　　（1）分离柱阻力过大(陈旧柱子)；

　　（2）柱前导管堵塞；

　　（3）泵柱塞内有少量气泡存在；

　　（4）柱子进口处过滤膜堵塞；

　　（5）进样阀手柄未旋到底(处于中间状态)；

　　（6）导管中有颗粒状固体堵塞；

　　对应排除方法：

　　（1）更换柱子；

　　（2）从柱后开始逐级向上拆开接头检查；

　　（3）拆开泵接头，用“清洗”档赶尽气泡。；

　　（4）拆开柱前接头、更换或清洗过滤膜；

　　（5）左右旋动六通阀至极限位置；

　　（6）逐级检查，并更换导管；

　　6、基线大幅度波动(即紫外检测器的输出电平值极不稳定)

　　原因：流通池内留有大量的气泡；流通池漏液；紫外检测器有故障

　　对应排除方法：排除气泡；检修流通池；停止恒流泵工作，检查紫外检测器

　　7、温度指示波动＞±1℃

　　原因：

　　（1）设置温度值过低；

　　（2）柱箱密封盖未盖好；

　　（3）温度控制器未启动；

　　（4）柱箱升过高温后，再设置低温；

　　（5）温控部件有故障；

　　（6）控温铂电阻接触不良；

　　对应排除方法：

　　（1）设置**低温度应室温以上10℃；

　　（2）检查柱安装过程；

　　（3）按起始键(指示灯亮)；

　　（4）开机后会逐渐稳定(正常现象)；

　　（5）修理温度控制器；

　　（6）拧紧固定铂电阻引线的螺钉；

标签: 液相色谱仪 液相色谱仪 几项液相色谱仪常见故障排除方法_液相色谱仪 　　【仪器网 使用手册】色谱法的分离试验方法是溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出的分离过程，其实质是一个吸附与解吸附的平衡过程。　　色谱柱与流动相的温度，影响着组分的分离平衡，对于使用柱温箱的有益之处我们认为有以下几点：　　1. 可以使保留时间相对恒定，对需要进行的定性鉴别可提高其可信度；　　2. 保留时间相对恒定是进行定量的基础，不同的保留时间不仅不能判断其成份的一致性，同时，由于保留时间不同峰面积也必将发生变化，其检测结果的可信度将受质疑。　　3. 温差较大时，因保留时间不稳将增加检测工作的麻烦。　　4. 温度低的时候，因流动相黏度增加而使检测时间延长，同时增加泵的磨损，影响设备的使用寿命。　　5. 温度低的时候还因溶解度相对下降而出现缓冲盐结晶而堵塞泵、进样阀、管道、色谱柱的现象。　　6. 温度低时还因溶解度下降使杂质吸附在填料上而难于洗脱，从而 影响色谱柱的使用寿命。　　☆对于流动相温度的控制目前没有很好的方法，即使是整个室内使用空调也难于使流动相的温度保持一致，因此，目前大多采用控制柱温的方法，使用柱温箱能耗低，控温精度高，是液相色谱仪必备的辅助设备，药品标准中，有不少品种对柱温也有明确要求。