销售经理必懂的液相色谱仪常用术语 液相色谱如何使用

液相色谱仪作为常用分析检测设备，价格比较贵，目前仍以进口为主。今天的跟大家分享的知识点是在本系列手册气相色谱分册中已列出的色谱常用术语,一般不再重复,但考虑到系统的完整性,这里对某些重要概念再次给出相应说明。这里基于国家标准和**近发表的色谱文献列出液相色谱常用符号、术语及对应的英文名称。平面色谱、毛细管电泳、芯片中常用符号及术语将在相关部分介绍。 一、常用一般术语 定性分析(qualitative analysis)为检测试样中的元素、官能团或混合物的组成成分而进行的分析。 定量分析(quantitative analysis)为测定试样中各种成分(如元素、根或官能团等)的合量而进行的分析。 常量分析(macro analysis)一般指试样质量大于0.1g的分析,也可指被测组分量高于千分之一的分析。 半微量分析(semimicro analysis)一般指试样质量在10~100mg的分析。 微量分析(micro analysis)一般指试样质量在1~10mg的分析,也可指被测组分合量约为万分之一至百万分之一的分析。 超微量分析(ultramicro analysis)一般指试样质量小于1mg或取样体积小于0.01ml的分析。 痕量分析(trace analysis)指物质中被测组分质量分数小于0.01%的分析,也可指被测组分含量在百万分之一以下的分析。 超痕量分析(ultra-trace analysis)物质中被测组分质量分数小于0.0001%的分析。 **误差(absolute error)测量结果减去被测量的[约定]真值。 相对误差(relative error)**误差与被测量的[约定]真值之比。 随机误差(randomerror)在重复测量中按不可预见方式变化的测量误差的分量。 系统误差(systematic error)在重复测量中保持不变或按可预见方式变化的测量误差的分量。 标准偏差(standard deviation)在对同一被测量进行n次测量时,表征测量结果分散程度的参数,用符号S表示。 相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)标准偏差(S)与算术平均值的**值之比。 测量不确定度(uncertainty of measurement)表征被测量的真值在某个量值范围的、种估计。 测量不确定度一般包含多个分量,其中一些分量可在测量结果统计分布的基础上进行估计,并可用标准偏差表征,其他分量只能基于经验或由其他信息估计。 标准物质(standard material)具有足够的准确度,可用以校准或检定仪器、评定测量方法或给其他物质赋值的物质。 校准(calibration)在规定条件下为确定测量仪器或测量系统的示值与被测量相对应的已知值之间关系的一组操作。 校准液(calibration solution)准确知道其成分,用以校准仪器的溶液。通常由一种或多种校准组分和一种溶剂组成。 试验溶液(test solution)已知其成分,用以对仪器进行试验的溶液。 校准组分(calibration component)直接用于校准和测试的组分。 浓度(concentration)表示物质中不同组分之间相对量的一种数量标记。分析中常用的有质量浓度(单位为kg/L)、物质的量浓度(单位为mol/L)、质量摩尔浓度(单位为mol/kg)、质量分数(%)和体积分数(%)等。 试样(sample)供试验或分析用的被测物质。范围(range)由上、下限所限定的一个量的区间。身徽 注:"范围"通常加修饰语。例如:测量范围、标度范围等。量程(span)仪器测量上限值与下限值的代数差。 稳定性(stability)在规定工作条件下,输入保持不变,在规定时间内仪器示值保持不变的能力。可以用量程漂移、零点漂移或基线漂移表示。 量程漂移(span drift)在规定工作条件下,规定时间内的量程变化。 零点漂移(zero drift)在规定工作条件下,规定时间内零点示值的偏移。 基线漂移(baseline drift)在规定工作条件下,规定时间内,仪器的响应信号随时间定向的缓慢变化。 基线(base-line)在恒定的条件下,仪器的响应信号曲线。 液相色谱仪的基线是指在仅有流动相通过检测系统时的响应信号曲线。 输出波动(output fluctuation)又称噪声。

不是由被测组分的浓度或任何影响量变化引起的相对于平均输出的起伏。

二、灵敏度与准确度 灵敏度(sensitivity)仪器的输出量与输入量之比,常用符号S表示。对于非线性响应的仪器,则为输出量对输入量的导数。 准确度（accuracy）示值与被测量真值（约定真 　　【仪器网 维修保养】液相色谱柱在使用过程中常见的问题有柱压升高、峰拖尾变宽、分离效果下降等。一般情况下这些都是色谱柱使用时间过长引起的正常现象，只需对色谱柱进行清洗与再生便可解决。但是如果柱压突然升高，则需要检查色谱柱是否出现问题。可能的原因有以下几点：　　1.柱头的过滤筛板被污染　　解决方法：卸下柱头螺丝，将过滤筛板取下，放置在30%左右的稀硝酸中，然后用超声波清洗10分钟。再将过滤筛板放入超纯水，超声清洗约10分钟，之后将过滤筛板重新装回色谱柱。　　2.填料被污染　　解决方法：　　①卸下柱头螺丝，将前端被污染的填料用专用小匙挖出，然后重新填入相同的填料。　　②选择合适的流动相，按色谱柱使用的方向冲洗，冲洗量须大于色谱柱体积的20倍，将污染物溶解并冲出色谱柱，然后，按照色谱柱标明的箭头方向使用。　　3.缓冲盐溶液遇到纯有机相析出盐结晶，堵塞色谱柱　　解决方法：先用冲洗色谱柱，将盐晶体溶解并冲出色谱柱，然后换高浓度甲醇水溶液或其他有机溶剂作为流动相。　　4.流动相的PH值偏差过大，造成固定相溶解或结构被破坏　　解决方法：此时很难将色谱柱修复通常需要直接更换色谱柱。

 1、色谱柱的使用说明：

　　（1）色谱柱使用前注意事项：

　　色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。

　　（2）流动相：

　　流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水**好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。

　　以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0，BDS C18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0-10.0。当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。

　　（3）样品：

　　样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。

2、色谱柱的保存

　　（1）反相色谱柱每天实验后的保养：

　　使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。

　　（2）长期保存色谱柱：

　　如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度**好是室温。

3、色谱柱的再生

　　因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。

　　（1）反相柱的再生：依次采用20-30倍的色谱柱体积的甲醇：水=10：90 （V/V），乙腈，异丙醇作为流动相冲洗色谱柱，完成后再以相反顺序冲洗色谱柱。

　　（2）正相柱的再生：依次以20-30倍色谱柱的体积的正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作为流动相冲洗色谱柱，然后再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必须严格脱水。

4、色谱柱在使用过程中易出现的问题和解决办法

　　色谱柱在使用中**常见的问题就是柱压升高，如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加，属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高（系统管路堵塞及压力传感器故障除外），以下列举了部分常见原因及解决办法：

　　（1）色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染；

　　解决方法：如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染，可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力，或者卸下色谱柱头，将其放在10％的稀硝酸内超声清洗10分钟，后再用纯水超声10分钟，重新装入色谱柱。

　　（2）色谱柱头的填料被样品污染；

　　解决方法：如确定色谱柱头的填料被污染，将柱头螺丝卸下，挖出柱内前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔细修复后，重新安装上柱头螺丝。

　　（3）色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂，形成结晶析出；

　　解决方法：如确定定是盐结晶，用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解，再换高浓度甲醇。

　　（4）流动相PH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。

　　解决方法：如果因PH值使用不当，很难恢复。