紫外可见分光光度计的暗电流介绍 光度计如何使用

　　紫外可见分光光度计的暗电流是在分光光度计中，光电检测器（光电倍增管或硅光二极管等）在没有受到任何光照的情况下所输出的电流信号。 紫外可见分光光度计的暗电流的产生： 暗电流是光电检测器的一种特殊产物，无论是光电管（电子流）还是硅光二极管（价电子移动）只要处于通电状态均会产生暗电流;从严格意义上讲，由于分光光度计的光信号检测系统（也成为光电转换器）不仅有光电检测器同时还包括放大电路，因此放大系统对暗电流的大小、漂移及噪声的影响也不可小视。 紫外可见分光光度计的暗电流对分析结果的影响： 对于分光光度计的试验方法无需再赘述，假如被测样品的透过（或反射）光信号到达光电检测器后与检测器本身的暗电流信号叠加在一起被放大处理，其测试结果的可信度和真实性就会大大打折扣;实践证实，尤其在双光束双检测器类型的仪器上，假如不进行暗电流的校正，有时结果值与真实值相差甚远。 紫外可见分光光度计的暗电流校正与样品背景扣除的熟悉误区： 在分光光度计的应用上，人们早已熟悉到样品背景对分析结果的影响，为了得到真实的光谱（也称之为校正光谱）双光束分光光度计仪器应运而生。使用者在测定前在两个通道上均放进空缺液或参比液，在单波长方式下仅按调零键即可，假如是做波长扫描则要做基线记忆或称为基线校正，其目的就是做背景扣除。但有些仪器使用者对暗电流校正往往忽略或不了解甚至误将背景校正看做为就是暗电流校正。

原子荧光光度计的检定和校准中的常见问题

　　原子荧光光谱分析方法已广泛应用于卫生检验、农业、冶金、地质、环保、医学等多个领域，因而开展原子荧光光度计的检定、校准工作是计量测试行业适应分析技术发展的必然要求。

　　按照JJG939-1998《非色散原子荧光光度计》国家计量检定规程的要求，以测定砷、锑元素的性能作为其检定/校准指标。使用原子荧光光度计测定砷和锑的试验方法是：在酸性条件下，砷中进行原子化。以砷、锑高强空心阴极灯作激发光源，使砷、锑原子发出荧光，荧、锑和硼氢化钾（或硼氢化钠）与酸产生的新生态的氢反应，生成氢化物气体。以惰性气体（氩气）为载体，将氢化物导入电热石英炉原子化器光强度在一定范围内（元素浓度较低时）和砷、锑含量成正比。但是在日常的检定和校准过程中，可能会由于一些常见小问题的疏忽而导致检测得出的仪器灵敏度、精密度及线性等技术指标的结果不理想，现简单归纳如下。

　　一、室温

　　氢化物发生反应的速度受温度影响，室温低于15℃时，经稀释的砷、锑标准溶液至少应放置30min。依据经验，仪器室温在（15～30）℃之间为宜，以22℃左右为**佳，且相对稳定。

　　二、灯位

　　两个空心阴极灯发出的光束应汇聚在原子化器石英炉的火焰中心，以激发产生的原子荧光。在测定锑、砷时，应尽量使用火焰的根部。原子化器的位置对仪器的灵敏度、稳定性影响很大。原子化器高度即炉高，它是指石英炉炉口距光电倍增管中心的距离，经验推荐值为8mm。炉高值增大，石英炉则下降。

　　三、光电倍增管的负高压和灯电流

　　增大负高压和灯电流可以使灵敏度提高，但同时会使稳定性下降，因此在灵敏度可以满足要求时，要尽可能的降低负高压和灯电流。并且选择过大的灯电流会缩短灯的寿命，在某些情况下还有可能造成工作曲线的弯曲。通常砷灯的灯电流调至60mA左右，负高压置于300V附近。

　　四、酸度

　　氢化物反应是在酸性介质中发生的，在10%～20%的酸度范围内，仪器测量的相对标准偏差小于5%。由于仪器分析灵敏度高，测定时对试剂纯度的要求较高，特别是酸的纯度不高时，空白值会偏高，不稳定，从而导致工作曲线线性不理想。

　　所以特别注意，要使用优级纯盐酸，同时使用二次去离子水配制溶液，减少空白。

　　五、硼氢化钾（或硼氢化钠）溶液的浓度

　　硼氢化钾溶液的浓度越大越容易引起液相干扰，所以要尽可能采用较低的硼氢化钾浓度。硼氢化钾的水溶液不大稳定，并且浓度越稀越不稳定，必须加入氢氧化钾来提高其稳定性。但是氢氧化钾的量过大，又会急剧降低仪器检测的灵敏度，因为其会降低反应时的酸度。测定砷时所需还原剂硼氢化钾溶液的浓度通常约为2％。并且，硼氢化钾溶液放入小于10℃的冰箱内至多可保存2周，推荐现用现配**佳。硼氢化钾－氢氧化钾溶液与硼氢化钠－氢氧化钠溶液一般可以互相代替使用。

　　砷和锑的荧光强度会受许多因素的影响，尤其是光电倍增管的负高压和灯电流、反应介质等因素为甚。在原子荧光光度计的检定、校准工作中，要根据具体情况，选择**适宜的条件，尽量排除干扰，才能使仪器达到**佳的检测水平。

标签: 原子荧光光度计 原子荧光光度计 原子荧光光度计的检定和校准中的常见问题_原子荧光光度计 分光光度计测量条件的选择

　　1、参比溶液和溶剂的选择　　分光光度计的测量实际上是以通过参比池的光强度作为人射光强度来测定试样的吸光度，先调节仪器使透过参比池溶液的吸光度为零，然后让同一束光通过样品，使得吸光度比较真实地反映待测物质的浓度，所以参比溶液的选择非常重要。　　如果仅有待测物质与显色剂的反应产物有吸收，可用纯溶剂或蒸馏水作参比溶液。如果显色剂有颜色，并在测定波长下有吸收，则用显色剂溶液作参比溶液，所加人显色剂及其它试剂的量，与试样中的加入量应一致。　　如果样品中其它组分本身的颜色对测定有干扰，而所用显色剂没颜色，则用不加显色剂的样品溶液作参比液。　　正确选择合适的溶剂，对提高分析的准确度起重要作用。为减小溶剂中杂质的影响，应选择高纯度的溶剂；溶剂应不与待测物质发生化学反应；待测物在溶剂中要有一定的溶解度；在测定的波长范围内，溶剂本身没有吸收，注意常用溶剂的**短可用波长；当用挥发性大的溶剂时，测量过程中吸收池应加盖。　　2、测试波长的选择　　当用分光光度计对溶液进行测定时，首先需要选择合适的测量波长。选择的依据是该被测溶液的吸收曲线。在一般情况下，我们总是选择**大吸收波长作为测量波长，这样可以提高灵敏度，而在有些情况下**大吸收峰很尖锐、吸收过大或附近有干扰存在，就不能选**大吸收波长，而必须在保证有一定灵敏度的情况下，选择吸收曲线中的其它波长进行测定（曲线较平坦处对应的波长），以消除干扰。绘制吸收曲线是正确选择波长的有效手段和方法。

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